發(fā)布時間:2017-03-28來源:來源:中國科學報
本報訊(記者朱漢斌 通訊員黃博純)近日,中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院呼吸疾病國家重點實驗室結核病研究室張?zhí)煊钫n題組發(fā)明了新的可高效構建無抗性標記的分枝桿菌的抗性表達盒。相關研究3月24日在線發(fā)表于《前沿微生物學》上。
該課題組首次發(fā)現(xiàn)硫鏈絲菌素抗性基因(tsr)可用作結核菌、卡介苗等的抗性篩選基因。硫鏈絲菌素相對便宜、用量少,產生自發(fā)耐硫鏈絲菌素的結核菌的突變率極低。同時它不用于治療結核,不用擔心產生耐藥的結核菌,且tsr用于對臨床菌進行遺傳操作較為理想。慶大霉素抗性基因(aacC1)可以用做恥垢分枝桿菌和大腸桿菌的抗性篩選基因。
該課題組把這兩個基因優(yōu)化加上合適的啟動子,同時在兩側加上可以被分枝桿菌Xer系統(tǒng)識別的可自動解離的dif序列。這樣就構成了dif-hsp60-aacC1-tsr-dif抗性表達盒。它可以用來高效構建大腸桿菌—分枝桿菌穿梭質粒,進而可以高效構建無抗性篩選標記的重組分枝桿菌,已申報專利。
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