本報訊（記者朱漢斌 通訊員黃博純）記者從中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院獲悉，該院研究員賴良學課題組首次構(gòu)建了新型條件性表達Cas9基因工具豬模型，利用此模型，率先實現(xiàn)了直接對成體大動物進行體內(nèi)基因編輯，并首次建立了大動物原發(fā)性肺癌模型。相關成果日前發(fā)表于《基因組研究》。該成果有助推動豬基因功能的研究進展并加快在生物醫(yī)藥及農(nóng)業(yè)領域有重要應用價值的基因修飾豬模型的建立。

　　據(jù)悉，由于豬在器官結(jié)構(gòu)、大小以及生理代謝、免疫系統(tǒng)等方面與人更加接近，被普遍認為是非常理想的大動物疾病模型、異種器官移植供體模型和異種器官再造受體模型。目前，對豬等大動物在體內(nèi)直接進行基因突變在技術(shù)上尚不可行。

　　研究人員利用基因打靶技術(shù)，成功將能夠剪開基因的Cas9蛋白基因插入到豬基因組一個特定的位點（ROSA26），相當于在豬體內(nèi)加入了一把“基因剪刀”，并在Cas9基因附近加上了能與Cre重組酶結(jié)合的loxp位點，后者相當于一個開關，能對其剪切功能的開啟加以控制。利用此工具模型，不需要依賴受精卵注射或體細胞核移植技術(shù)，研究人員在動物體內(nèi)轉(zhuǎn)入能識別特定基因的gRNA和重組酶，就可直接對豬的基因組進行編輯，從而快速獲得相應基因編輯豬模型。

　　研究人員將包裝的含有Cre重組酶和靶向六種腫瘤相關基因的gRNAs慢病毒通過滴鼻方式，感染工具豬的肺臟，在豬肺細胞的基因組發(fā)生癌化突變。3個月后，豬出現(xiàn)了典型的肺癌癥狀和病理變化，從而成功建立了原發(fā)性肺腫瘤大動物模型。利用條件性表達Cas9基因豬模型，可高效實現(xiàn)大動物體內(nèi)細胞單基因、多基因、超大片段基因的編輯。